蜘蛛女王是一种从三级蜘蛛巢中出现的BOSS级生物，蜘蛛巢会随机生成在大陆上，或者是通过蜘蛛卵进行移植。蜘蛛巢总共有三个等级，其中一级和二级蜘蛛巢均需要通过一定的时间成长为三级蜘蛛巢，在玩家进入三级蜘蛛巢的范围内一段时间后，将会从中出现一只蜘蛛女王，并且此时该三级蜘蛛巢将会重新变成一级蜘蛛巢。其他普通的蜘蛛都是白天睡觉晚上活动，而蜘蛛女王是相反的。
蜘蛛女王的生命值为两千五百点，攻击造成的伤害是八十点。除此之外，蜘蛛女王还自带每分钟减少四百点理智值的效果。蜘蛛女王会按照十秒一只蜘蛛的效率来进行繁衍，如果是不处于战斗状态，那么繁衍出的蜘蛛都是普通蜘蛛，如果处于战斗状态，那么会有大约百分之二十二的几率繁衍出蜘蛛护士或者是蜘蛛战士。蜘蛛女王产出蜘蛛的效率高，不过能够产出蜘蛛的上限并不是无限的，会有十六只蜘蛛的限制。
一只蜘蛛女王最多只能繁衍出当前总共十六只蜘蛛。蜘蛛女王繁衍出的蜘蛛会主动攻击玩家，将优先攻击蜘蛛女王锁定仇恨的目标，若玩家逃离攻击范围，那么蜘蛛将重新回到蜘蛛女王的身边。若玩家未能把蜘蛛女王打败，那么会在一点五天之后钻入地里，变成一级蜘蛛巢。若玩家使用的角色是小蜘蛛韦伯，在遇上蜘蛛女王时，蜘蛛女王持中立。
