艾尔登法环蚁后主要位于安瑟尔河区域的蚂蚁洞穴深处，此外深根底层、圣树区域也有分布，其中安瑟尔河的蚁后是玩家最易接触到的目标。
前往安瑟尔河蚁后所在洞穴，需先传送到宁姆格福东部的东边台地赐福点，该赐福靠近悬崖边缘，从山崖碎石处跳跃至下层平台，可找到升降机，乘坐升降机直达安瑟尔河底部河道。沿河道向北行进，途中会经过乌鲁王朝遗迹，此处敌人强度较高，可选择绕开避免不必要的战斗，继续前进抵达安瑟尔河水门赐福点后，附近地面会出现大量工蚁，这是蚂蚁洞穴入口的明显标志。
蚂蚁洞穴内部环境复杂，通道狭窄且布满巨型蚁卵与腐蚀性液体，光线昏暗的同时地面粘液会降低移动速度，普通工蚁会从地面突然钻出发动偷袭，攻击附带猩红腐败效果，还会群体围堵目标。推进时需放慢节奏，留意地面动静，优先清理工蚁，法师可使用冰箭等范围法术，近战职业适合选择大曲剑、长柄武器等具备范围攻击能力的装备，避免被工蚁围攻消耗状态。洞穴深处存在多条岔路，需选择右侧通道持续下行，直达洞穴最底层的封闭巢穴，蚁后便在此处栖息。
蚁后外观辨识度极高，是腹部异常膨胀的巨型蚂蚁，弱点为肥大的腹部，集中攻击该部位可快速削减其生命值。其攻击方式多样，包括远距离酸液喷射、近距离近身撕咬，还会不断召唤小型幼虫协助战斗，酸液喷射即便被盾牌格挡也能绕过部分防御造成伤害，同时附带猩红腐败累积效果。战斗时需保持中距离站位，时刻留意地面幼虫生成，优先清除召唤的幼虫避免被前后夹击，备好抗猩红腐败道具应对状态累积，当蚁后腹部发光时，需提前向侧方翻滚躲避酸液喷射。
击败蚁后可获得丰厚奖励，安瑟尔河的蚁后掉落黄金卢恩10和卢恩弯弧，深根底层的蚁后则固定掉落稀人卢恩和卢恩弯弧，同时还有概率获得蚁酸石等锻造材料，这些材料可用于制作酸液相关道具，助力后续探索与战斗。除安瑟尔河外，深根底层西北侧靠近大瀑布顶端赐福的洞穴、圣树区域的洞窟中也有蚁后分布，探索这些区域时，可参照安瑟尔河蚁后的应对方式，提前准备抗腐败装备与范围伤害武器，高效击杀获取资源。
